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发布时间：2023-03-24 09:33:18 来源：文档文库
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抗性的分类？SpectinomycinStreptomicinKanamicinAmpicillin
酵母菌筛选的原理？
Thegenerelatedtospecificaminoacidsynthesisisknockedoutinyeast,whileitexistsintheexogenousgene.ThoughYeastselectivemedia,thecellstransducedwithexogenousgenescouldbeselected.
转座子(TransposonAsegmentofDNAthatcanbecomeintegratedatmanydifferentsitesalongachromosome(especiallyasegmentofbacterialDNAthatcanbetranslocate.
转座(因子是基因组中一段可移动的DNA序列，可以通过切割、重新整合等一系列过程从基因组的一个位置“跳跃”到另一个位置。
关于Histag和GSTtag在蛋白纯化中的应用：
his-tag所用层析凝胶(chromatographygel的基质(matrix上连接了一个NTA（=nitrilotriaceticacid氮基三乙酸），可以与Ni离子结合，而Ni离子与融合蛋白的6Xhis氨基酸之间产生吸引力(attraction，从而将带有his-tag的融合蛋白与其它蛋白区分开来。组氨酸残基的五元咪唑环是蛋白与Ni离子作用的关键。
因此，当我们用高浓度的咪唑（imidazole）溶液洗脱(elute的时侯（如250mM），咪唑便与蛋白质his-tag的咪唑环竞争结合(competitivebind，最终将融合蛋白从凝胶上洗脱下来。
GST-tag纯化的作用力在于谷胱甘肽(glutathione与谷胱甘肽转移酶(glutathionetransferase之间的特异性的作用力。凝胶上的谷胱甘肽可以与GST-tag融合蛋白以这样的形式作用，从而将带标签的蛋白与其他蛋白分离开。
谷胱甘肽通常有氧化型(oxidizedformGSSG和还原型(reducedformGSH，当我们使用GSH洗脱时，GSH会与凝胶上的谷胱甘肽竞争结合融合蛋白，从而将目标蛋白洗脱。
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