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EMS诱变
EMS诱变
发布时间:2023-02-25 15:56:53 来源:
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EMS?
诱变?
常用浓度
0.05-0.5mol/L
,作用时间
5-60min
。
小心点,那东西剧毒且致癌。
人工化学诱变技术
:
化学诱变技术是指利用一些化学物质提高生物的自然突变率,这些化学物质就叫做
“化学诱变剂”。其特点有:可操作性强,简单易行;特异性较强,能诱变定位到
DNA
上的某些碱基;
后代较易稳定遗传,
一般到
F3
代就可稳定;
应用于遗传标记,是细胞融合
技术的基础。
诱变剂主要包括
5
类,他们的特点、机理和应用如下:
1
、烷化剂:能使一些碱基烷基化,比如使鸟苷酸甲基化,影响
mRNA
的转录,从而
使蛋白质的表达紊乱,使得蛋白质重组,而改变了性状。临床上应用此类物质作为抗癌药
物,具有强烈杀伤癌细胞的作用,所以在应用在于植物上时,也要注意他的强烈杀伤性。
主要有:甲基磺酸乙酯(
EMS
)
,是最常用的诱变剂,我们曾用作真菌的遗传标记,诱
变率很高。常用浓度
0.05-0.5mol/L
,作用时间
5-60min
。该物质具有强烈致癌性和挥发
性,可用
5%
硫代硫酸钠作为终止剂和解毒剂。
SIGMA
公司价格:
80
元
/25ml
。
硫酸二乙酯(
DMS
)
,也很常用,但由于毒性太强,目前很少使用,作用机理和使用
方法和
EMS
基本相同。属于剧毒品,受公安局管治。
乙烯亚胺,
生产的较少,
很难买到。
只要用于大量诱变育种用,
使用浓度:
0.0001-0.1%
,
高度致癌性!使用时需要使用缓冲液配置。
盐酸氮芥,用于抗癌药物,可以从药店买到,但有些地方必须有主任医师的处方。
一般是针剂,稍加稀释即可使用,作用时间
5-10min
,可用甘氨酸作为终止剂和解毒
剂。
环磷酰胺、亚硝基胍等物质也可作为诱变剂使用,但较少使用。
2
、碱基类似物:分子结构类似碱基,导致
DNA
复制时产生错配,
mRNA
转录紊乱,
功能蛋白重组,表型改变。该类物质毒性相对较小,但负诱变率很高,往往不易得到好的
突变体。主要有:
6-
溴尿嘧啶、
6-BudR
、马来酰肼、
2-
氨基嘌呤等,同样属于抗癌药物,
可到药店买到,稍加稀释即可使用。
3
、嵌入剂:是分子生物学比较常用的一类,诱导率较高。原理是这类分子的大小正好
可以嵌入碱基分子中,导致错配。最常用的:溴化乙锭(
EB
)
,高致癌性!价格较贵,但
诱变率很高,是实验室常用试剂,可以到生化实际商店买到,
1500
元
/100mg.
4
、
无机化合物:比较容易得到,效果一般,危险性较小。常用:氯化锂,白色粉状,
使用时配成
0.1-0.5%
的溶液,作用
30min-2d
。可到化工商店买到:
120
元
/500
克。
亚硝酸:没有现成商品,由于该物质易分解,所以现配现用。常用亚硝酸钠和盐酸制
取,将亚硝酸钠配成
0.01-0.1mol/L
的浓度,使用时加入等浓度等体积的盐酸即可。
过氧化氢:又名双氧水,效果不好,所以很少用到。
本文来源:
https://www.2haoxitong.net/k/doc/605841ea19e8b8f67c1cb9e5.html
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