细胞免疫荧光的染色方法
发布时间：1714434147 来源：文档文库
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不通透的染色方法:
封闭液:3%BSA 用PBS 配制不加吐温-20, 一抗,二抗用封闭液配制.
1. 4% PFA（多聚甲醛）室温 固定15min。
2. 1xPBS 洗三次，每次5min。 3. 3%BSA（不加吐温-20）封闭1hr。 4. 一抗4度过夜
5. 1xPBS 洗三次，每次5min。 6. 二抗37度 2hr。 7. 1xPBS 洗三次，每次5min。 8. DAPI 染色5min。
9. 1xPBS 洗三次，每次5min。
蔺红方法染色：蔺红用的方法封闭液里不加土温20 。我们模拟这个方法封闭液里加了土温20。
1. 4% PFA（多聚甲醛） 固定15min。 2. 1xPBS 洗三次，每次5min。 3. 0.2% tritonX-100 通透15min。 4. 1xPBS 洗三次，每次5min。 5. 3%BSA封闭0.5hr。 6. 一抗4度过夜。
7. 1xPBS 洗三次，每次5min。 8. 二抗37度 1hr。
9. 1xPBS 洗三次，每次5min。 10. DAPI 染色5min。
11. 1xPBS 洗三次，每次5min。 12. 封片。
通透的染色方法:
封闭液: :3%BSA 用PBS 配制，加千分之一吐温-20 一抗，二抗用封闭液配制。
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1、 细胞铺板，处理
2、 弃上清，甲醇-20℃固定10min 3、 