细胞培养失败常见原因及对策

发布时间:2023-03-20 04:08:40   来源:文档文库   
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表:细胞培养失败常见原因及对策

出现问题可能原因解决办法培养基中pH错误的CO2浓度调节C02浓度快速改变[NaHC02]2-3.7g/L,[C02]5-10%
培养瓶盖子过紧稍放松盖子
缓冲液量不足HEPES至最终浓度为10-20mM细菌、酵母和丢弃培养物、避免污染真菌污染

细胞不贴壁过量的胰酶消化减少胰酶浓度或消化时间
培养基中无粘附因子加大血清浓度或增加粘附因子细菌、霉菌、支原体污染检查并去除污染或丢弃
物理、化学污染去除相关污染

细胞生长速度降低改变培养基或血清比较培养基中成分,新旧血清比较

缺乏促进生长成分传代培养,加新鲜培养基和如谷氨酰胺或生长因子生长促进成分

培养基储存不当保存在2-8℃,
血清培养基应尽量避光
初次细胞接种量少增加细胞接种数量细胞衰老取得新细胞株
低度细菌和真菌污染无抗生素的培养基,如被污染,
则丢弃
支原体污染隔离培养,如污染,丢弃

细胞死亡C02检测C02温度波动检验温度
抗生素浓度超量有毒性少量使用抗生素细胞复苏受损重新复苏
渗透压错误检测培养基渗透压产生毒性代谢物去除并更换培养基

细胞成团悬浮CaMg离子存在用无Ca2+Mg2离子的平衡盐溶液清洗细胞
支原体污染隔离培养,检验支原体污染,如已经污染,则丢弃
胰酶过量,细胞DNA释放DNase处理细胞
细胞形态、生长
状况改变细胞间污染更换细胞



本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/1f4a6604a31614791711cc7931b765ce05087adb.html

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