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高效转化及感受态细胞的制备
高效转化及感受态细胞的制备
发布时间:2023-11-27 17:08:52 来源:
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希望对大家有所帮助,多谢您的浏览!
关于感受态细胞及转化
克隆
/
建库
/
表达专用超级高效感受态细胞
国外的同学说一般他们克隆都是直接购买感受态细胞转化,实验效率很高的。我总是以为如果是一般的
克隆实验,自己做感受态好像够用了--如果是建库,购买现成的感受态细胞就是非常必要的首选,因为转
化效率确实比实际手工制备的高
2
-
3
个数量级以上,特别是建库,能实实在在地提高实验的效率。实际上,
除了建库以外,
Stratagene
为更好的表达蛋白、
以及转化效率较低的巨无霸质粒,
而特别优化了一些感受态
细胞,做表达的人其实可以参考一下,有点用处的。生物通在这里借用
Merck
公司提供的资料供大家参考。
Stratagene
的
XL10-
Gold®几乎算得上是高效转化的代名词了,
研究者一旦要克隆大质粒、
连接
DNA
和建库,克隆甲基化
DNA
,进行蓝白斑筛选等,首选的就是
XL10-
Gold®和其衍生菌。
XL10-
Gold®用途
包括:
--
克隆大
DNA
:包括表达质粒,基因组
DNA
克隆
--
构建质粒文库:减少
DNA
大小偏倚性,使全长
cDNA
克隆、双杂交质粒等各种大小的质粒转化效率
更接近,提高文库代表性(比
DH10B
高
25
倍)
。
Hte
基因型
Hte
(高效转化)基因型是
Stratagene
开发的特异性提高大质粒、连接
DNA
的宿主菌基因型,并使细
胞生长加快
(当天获得菌落)
,
已经成功应用于
25kb
超螺旋
DNA
和
8kb
连接
DNA
的克隆。
XL10-
Gold®,
BL21-Gold
,
BL21-
CodonPlus®,SoloPack®Gold
和
96Pack®Gold
等系列细胞都带有这个新的性状。
超级感受态细胞
Stratagene
提供多种
>5x10
9
转化子/μg
超螺旋
DNA
转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获
得大质粒、连接
DNA
克隆和建库时最值得推荐的。
1
/
11
希望对大家有所帮助,多谢您的浏览!
电转化感受态细胞
2
/
11
本文来源:
https://www.2haoxitong.net/k/doc/a3dee6a300768e9951e79b89680203d8cf2f6af2.html
《高效转化及感受态细胞的制备.doc》
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